بیان مینی ژنهای فاکتور ۹ انعقادی انسانی در سلولهای کلیه انسان
نویسندگان
چکیده
پیش زمینه و هدف: نقص در عملکرد فاکتور 9 منجر به بیماری هموفیلی b می گردد. استفاده از فرآورده های پلاسمایی جهت جلوگیری از خونریزی، خطر انتقال عوامل عفونی را افزایش می دهد. بنابراین امروزه استفاده از فاکتور 9 نوترکیب، به عنوان جایگزین مناسب نوع پلاسمایی آن مطرح شده است. به منظور بیان و تولید فاکتور 9 نوترکیب، استفاده از یک وکتور بیانی با توالی های تنظیمی سیس مناسب ازجمله توالی های اینترونی لازم است. مواد و روش کار: 4 وکتور پلاسمیدی بیان کننده فاکتور 9 که فاقد و واجد اینترون های ژن بتا گلوبین (در جایگاه معادل خود در cdna فاکتور 9 ) ساخته شدند و با روش لیپوفکشن به سلول های hek-293t ترانسفکت شدند. سپس کارایی پلاسمیدها در بیان فاکتور 9 با انجام آزمون الایزا بر محیط کشت سلول ها در 3 روز متوالی پس از ترانسفکشن و نیز آزمون نیمه کمی rt-pcr انجام پذیرفت. یافته ها: در روز سوم پس از ترانسفکشن، بالاترین بیان فاکتور 9 از سازه ژنی بدون اینترون و سازه ژنی دارای اینترون 1 بتا گلوبین به دست آمد. در بیان فاکتور 9، اینترون 1 بتا گلوبین مؤثرتر از اینترون 2 آن بود. همچنین بر مبنای نتایج rt-pcr نیمه کمی، بالاترین میزان mrna از سازه ژنی بدون اینترون به دست آمد. بحث و نتیجه گیری: سازه های ژنی بدون اینترون و دارای اینترون 1 ژن بتا گلوبین، کاراترین سازه ها در بیان فاکتور 9 بودند. استفاده از اینترون های بتا گلوبین در cdna فاکتور 9 بیان این پروتئین را در مقایسه با سازه ژنی بدون اینترون کاهش داد. این کاهش بیان را می توان با احتمال، به اسپلایسینگ نادرست اینترون های بتا گلوبین در cdna فاکتور 9 نسبت داد.
منابع مشابه
بیان مینی ژنهای فاکتور 9 انعقادی انسانی در سلولهای کلیه انسان
Background & aims: Hemophilia B is caused by either functional deficiency or lack of the human coagulation factor IX (hFIX). The current protein-based therapy with plasma-derived proteins increases, the risk of blood-borne pathogens transmission. Therefore, replacement therapy with recombinant hFIX (rhFIX) is an attractive alternative to plasma derived hFIX concentrates. In order to express and...
متن کاملتأثیر توالی کوزاک در بیان موقت مینی ژنی از فاکتور ۹ انعقادی در سلولهای پستاندار
زمینه: قابلیت توالی کوزاک در افزایش بیان ژن های یوکاریوتی مشخص شده است. با توجه به این موضوع می توان از این توانمندی در جهت افزایش بیان پروتئین های نوترکیب استفاده کرد. مواد و روش ها: با هدف بالا بردن بیان ژن فاکتور ix انعقادی، سازه ای بیانی مجهز به پروموتر سایتومگالو ویروس انسانی (cmv) که بیان یک مینی ژن فاکتور ix را تحت کنترل داشت، به توالی کوزاک تجهیز شد. پس از تأیید صحت سازه نوترکیب، این سا...
متن کاملبررسی بیان مینی ژن های فاکتور ۹ انسانی در سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان
زمینه:سلول های بنیادی مزانشیمی هدف مناسبی جهت سلول درمانی و ژن درمانی بیماران هموفیلی b محسوب می شوند. این سلول ها دارای ویژگی های بی نظیر از جمله تمایز به طیف وسیعی از سلول های مختلف و ایمنی زایی اندک در شرایط پیوند می باشند که آن ها را برای سلول درمانی و ژن درمانی مناسب کرده است. بیان اندک ترانس ژن از مشکلات ژن درمانی است. با شناسایی توالی های تنظیمی و استفاده از آن ها در موقعیت های مناسب در ...
متن کاملبررسی بیان مینی ژنهای فاکتور 9 انسانی در سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان
زمینه:سلولهای بنیادی مزانشیمی هدف مناسبی جهت سلول درمانی و ژن درمانی بیماران هموفیلی B محسوب می‌شوند. این سلول‌ها دارای ویژگی‌های بی‌نظیر از جمله تمایز به طیف وسیعی از سلولهای مختلف و ایمنی‌زایی اندک در شرایط پیوند می‌باشند که آن‌ها را برای سلول درمانی و ژن درمانی مناسب کرده است. بیان اندک ترانس ژن از مشکلات ژن درمانی است. با شناسایی توالی‌های تنظیمی و استفاده از آن‌ها در موقعیت‌های مناسب در ...
متن کاملجداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....
متن کاملتاثیر اینترون 1 ژن بتاگلوبین انسانی بر روی بیان موقت فاکتور 9 انعقادی فعال انسانی در رده‌ای از سلولهای پستانداران
چکید ه سابقه و هدف تاثیر حضور اینترون‌ها در افزایش بیان ژن‌ها در سلولهای پستانداران نشان داده شده است. در این مطالعه کارایی اینترون 1 ژن بتاگلوبین انسانی بر بیان موقت cDNA فاکتور 9 انسانی در رده سلولی تخمدان هامستر چینی( CHO ) تحت کنترل پروموتر سیتومگالوویروس نشان داده شد. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. در این پژوهش اینترون 1 ژن بتاگلوبین انسانی بین اگزون‌های 1 و 2 ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله پزشکی ارومیهجلد ۲۷، شماره ۷، صفحات ۵۸۹-۵۹۷
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023